Nanospotten von Proteinen auf SPR-Chips

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Dieses Buch beschreibt und charakterisiert eine Methode zur Protein-Funktionalisierung von SPR-Chips mittels Nanospotting-Technologie. Im Fokus steht dabei ein automatisiertes Pipettiersystem, welches mit Hilfe piezoelektrischer Mikropipetten kleine reproduzierbare Tropfen berührungslos auf Oberflächen spotten kann. Anhand der Modellsysteme pp65-Antigen/Antikörper des Cytomegalie-Virus und Protein A/IgG wurde erfolgreich ein Protokoll zum Spotten von Proteinen entwickelt. Basierend auf der am Fraunhofer IWS etablierten Oberflächen-plasmonenresonanz-(SPR)-Technologie erfolgte der spezifische Antikörper-Nachweis. Mit Hilfe von SPR-Messungen konnten die Parameter zum Erstellen von homogenen und hochqualitativen Arrays charakterisiert, die Stabilität von gespotteten SPR-Chips untersucht und abschließend Möglichkeiten einer Signalsteigerung von Antigen-Antikörper-Assays geprüft werden. Im Hinblick auf immunologische Anwendungen bietet die Kombination aus SPR-basierten Messverfahren und Spotting-Technologie die optimale Basis für die Entwicklung eines differentialdiagnostischen Verfahrens in der Medizindiagnostik.